简石生物酵母感受态制备与转化试剂盒(TT2001)
产品介绍
产品简介:
酵母感受态制备与转化试剂盒使酵母转化比目前广泛使用的方案更快捷,更有效,进一步提高了转化效率。用该试剂盒制备的酵母感受态细胞可立即用于转化试验,也可以在-70℃或低于-70℃冷冻保存(缓慢冷冻保存),以备长期使用。该方法适用于环状和线性化DNA。
产品特点:
★ 快速制备转化效率高的酵母细胞。
★ 每微克的质粒DNA转化效率可达到105-106。
★ 冷冻储存的酵母细胞可长期使用。
★ 10分钟就可以制备酵母感受态细胞,步骤快速简单。转化流程只需一步,简单快速,只需1小时。
★ 适用范围广泛:包括酿酒酵母、白色念珠菌、裂殖酵母、毕赤酵母等。
★ 兼容环状DNA和线性DNA。
感受态细胞的制备:
1. YPD固体培养基划线酵母细胞,30℃恒温培养,直至长出酵母单菌落(酵母单菌落直径在3mm左右最好)。
2. 挑取酵母单菌落转至30 ml YPD液体培养基,在30℃ 250rpm条件下培养。(以下步骤均室温操作)
3. 待酵母细胞OD 600为0.8-1.0时,取3ml转接至30ml YPD液体培养基,30℃ 250rpm条件下培养。
4. 测细胞密度,OD600值为0.8-1.0即可。
5. 取15ml上述酵母细胞培养物,放到无菌离心管中,1000g离心4分钟,丢弃上清。
6. 用10ml的溶液1清洗细胞,充分重悬,离心后丢弃上清。
7. 加入1ml的溶液2充分重悬细胞,按 50μl每管分装于无菌离心管中,感受态细胞即制备完毕,可直接用于转化。
注意事项:
1.以上步骤均为无菌操作;
2.此时感受态细胞可直接转化,或在-70℃以下冷冻保存,以备长期备用。慢慢冷冻细胞很重要,可以用毛巾均匀的包裹细胞,也可以在放入冰箱前装在泡沫盒中。禁止使用液氮快速冷冻细胞。
产品订购:
货号 | 产品名称 | 规格 |
TT2001-20 | 酵母感受态制备与转化试剂盒 | 20次 |
TT2001-120 | 120次 |
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