简石生物血液/细胞基因组 DNA 小量提取试剂盒(TD324)

产品简介：

简石生物血液/细胞基因组DNA小量提取试剂盒(TD324)可从全血、有核血、血块黄层、唾液、痰，精子、乳汁等样品里提取到高纯度的基因组DNA；通过该产品获得的基因组 DNA 产量高、纯度好，可以直接用于酶切、PCR、高通量测序等敏感的分子生物学实验。

产品特点：

★ 样品种类多：全血、有核血、血块黄层、唾液、痰、精子、乳汁等样品，保存在保护剂里的样品等。获得的基因组 DNA 产量高、纯度好，可以直接用PCR 等各种分子生物学实验。不推荐使用此试剂盒提取小DNA 或者游离DNA；

★ 基因组 DNA 一般大于50kb：一般可回收到大于 50 kb 的基因组DNA。如果样品中存在线粒体DNA，病毒DNA 等也会一起提取到；

★ DNA 产量高、纯度好：获得的基因组 DNA 产量高、纯度好，可以直接用 PCR 等各种分子生物学实验。一般情况Abs260/280 ≥ 1.8 Abs260/230 ≥ 2.0；

★ 基因组 DNA 产量高：针对哺乳动物一般 100µl 全血中回收到3µg 以上的基因组DNA。

产品操作步骤：

使用基因组DNA洗脱液或其他等渗溶液（如PBS）来重悬培养的细胞沉淀。(≤1 x 106细胞使用 100 μl 基因组DNA洗脱液106-5 x 106细胞数使用200 μl基因组DNA洗脱液)55℃下的蛋白酶K过夜消化不会影响DNA的完整性。以生物液体和细胞为例：

1. 添加最多200µl的样品到一个离心管中并且添加：200µl 液体与细胞消化液（红色）20µl 蛋白酶K。

注意：如果样品不足200µl则需要按照比例调整液体与细胞消化液（红色），蛋白酶K及其基因组DNA结合液的用量；

2. 混匀或者涡旋振荡10-15秒然后再55℃下孵育10分钟；

3. 混匀1倍体积的基因组DNA结合液到消化的样品中，混匀或者涡旋振荡10-15秒。例如：添加420µl的基因组DNA结合液到420µl消化的样品中；

4. 将上清转移至2L柱中，2L柱套在一个收集管里，在≥12,000 x g 离心力下离心1分钟。丢弃盛有滤出液的收集管；

5. 将2L柱套在一个新的收集管里，添加400μl的基因组DNA洗涤液1到2L柱中，在≥12,000xg离心力下离心1分钟，倒掉收集管中的废液；

6. 添加700μl的基因组DNA洗涤液2到2L柱中，在≥12,000xg离心力下离心1分钟，倒掉收集管中的废液；

7. 添加200μl的基因组DNA洗涤液2到2L柱中，在≥12,000 x g 离心力下离心1分钟。丢弃盛有滤出液的收集管；

8. 将2L柱移至干净的1.5ml离心管中直接添加≥ 50μl的基因组DNA洗脱液到柱基质上（洗脱液事先在65-70℃水浴中预热效果更好，如果是25mg的组织可以添加200μl），室温下放置2-5分钟，全速离心1分钟来洗脱基因组 DNA。

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