简石生物微量总RNA提取试剂盒(TR206)

产品简介：

简石生物微量总RNA提取试剂盒(TR206)适用于从细胞，组织，酵母菌，植物，细菌或生物液体(任何TRIZOL或类似产品可以裂解的样品)中提取到总RNA(含microRNA)；使用该试剂盒无需进行相分离，无需使用氯仿，无需沉淀过程，提取到的RNA不含DNA，并可应用于qPCR，高通量测序等实验；整个过程仅需10分钟。

产品属性：

1、样品来源：TRIZOL等类似试剂裂解的样品；

2、样品范围：≥ 17核苷酸；

3、RNA纯度：高质量的RNA可应用于高通量测序等敏感的下游实验；

4、RNA结合量：每个柱子可最多结合10μg的RNA。

产品操作步骤：

整个步骤是由2部分组成：(I)样品裂解匀浆；(II)样品纯化。

注：以下离心力如无特殊说明均在10,000-16,000xg范围内离心1分钟。

(I) 样品裂解匀浆

此步骤主要参考TRIZOL等类似裂解试剂说明书的裂解液用量，以下给出简石提供的可完美替换TRIZOL的TRIcom试剂用量作为参考。

a. 组织

组织：每5mg组织加300μL的TRIcom。裂解之后需要离心去除不溶的组织，然后将上清移置到一个RNase-free的离心管内进行下面的样品纯化步骤；

b. 细胞

依据细胞的数量来决定所需的TRIcom用量：动物(10⁵细胞以内加100μL, 10⁶细胞加300μL)；细菌(10⁸细胞以内加300μL)；酵母(10⁷细胞以内加300μL)。

c. 液体样品直接取1体积的液体样品，加入3倍体积裂解液(推荐100μL全血加入300μL以内)，充分振荡并且混匀；

(II) 样品纯化：

1. 加入等体积(95-100%)的无水乙醇到上一步TRIcom或TRIZOL裂解液中混匀；

2. 将上述混合物放入套在收集管内的1号C纯化柱里，离心1分钟。去除滤出液；

3. 柱上DNaseI消化处理(推荐)此步骤主要是为了去除痕量的DNA；

a) 添加400μL的RNA洗涤液2到1号C纯化柱里，离心1分钟，去除滤出液；

b) 对于每一次的样品处理需要制备40μL的DNaseI反应液。配比为DNaseI 5μL(6U/μL)，DNA消化液35μL；

c)直接添加混匀的40μL DNaseI反应液到1号C纯化柱上，在室温下(20-30℃)孵育15分钟；

4. 添加400μL的RNA洗涤液1到1号C纯化柱里，离心1分钟，去除滤出液；

5. 添加700μL的RNA洗涤液2到1号C纯化柱里，离心2分钟以免洗涤液残留；

6. 取出1号C纯化柱，放入一个无RNA酶的离心管中，在吸附膜的中间部位加15μL RNase-freewater(事先在65 -70℃水浴中加热效果更好)，室温放置2分钟，离心1分钟洗脱RNA。

产品订购：

货号	产品名称	规格
TR206-50	微量总RNA提取试剂盒	50次
TR206-200		200次
TR206- D-50		50次含Dnase I
TR206- D-200		200次含Dnase I