简石生物去内毒素质粒DNA小量提取试剂盒(TD429)

产品简介：

简石生物去内毒素质粒DNA小量提取试剂盒(TD429)具有独有的显色反应，可以直接观察到细胞裂解中和的程度，极大方便操作者判断其状态。快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。通过简石生物去内毒素质粒DNA小量提取试剂盒(TD429)获得的质粒产量高、纯度好，内毒素含量极低 ，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序、转染等各种分子生物学实验。该产品仅供科研使用。

产品特点：

★    DNA 纯度好：获得的质粒产量高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、 测序转染等各种分子生物学实验。一般情况Abs260/280 ≥1.8，Abs260/230 ≥2.0，内毒素含量小于1EU/μg；

★    质粒DNA产量高：每次可提取到约100μg ，主要依据质粒的拷贝数，培养物的成长环境等因素；

★    质粒DNA大小最高可达25 kb；

★    洗脱体积≥ 25 μl；

★    在室温(15-30°C)下操作温度；

★    操作时间大约15 分钟。

产品操作步骤：

1. 取 0.5-5m 过夜培养的菌液转移到2ml 带盖收集管中，全速离心力下离心15-20秒，尽可能多的去除上清，收集菌体。

2. 用250μ溶液P1重悬菌体沉淀， 可用吸头反复吹打或涡旋振荡至彻底悬浮。(如果有未彻底混匀的菌块，会影响裂解，导致提取量和纯度偏低。)

3.加250u的溶液P2，温和地上下翻转 6-8次使菌体充分裂解，室温放置 2-3分钟。(温和地混合，不要剧烈震荡，以免基因组DNA剪切断裂!所用时间不应超过5分钟!以免质粒受到破坏。此时菌液应变得清亮粘稠，如果菌体少，很快清亮粘稠后就可以做下一步。)

4. 加250μ溶液 P3(预冷)，立即温和地上下翻转3-4次，中和完全后会出现黄色絮状沉淀。(中和完全后溶液完全呈现为黄色)

5. 将上述中和的裂解物在冰上孵育5分钟。然后在16,000 xg的离心力下离心5分钟。

6. 将步骤5中的600μ上清转移到干净的1.5mL离心管内。(不要碰到下面的黄色沉淀)然后在1.5ml 离心管内加入 260μ质粒 DNA 结合液，盖上盖子颠倒8次左右使其混匀。

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