SURE Competent cell
简石生物SURE感受态细胞(JSR1706)
产品品牌:简石生物
产品货号:JSR1706-10;JSR1706-100
产品规格:10×100μl;100×100μl
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产品介绍
产品简介:
简石生物SURE感受态细胞(JSR1706)由大肠杆菌SURE菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效应可达107,-80℃保存三个月转化效率不发生改变,但不可多次冻融。
产品注意事项:
·涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300ml转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
·新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
·为防止转化实验不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,将损失降到最低。
·涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
菌株基因型:endA1 gyrA96 lac relA1 sbcC supE44 recB recJ thi-1 uvrC
产品操作步骤:
1.取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100ul,可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。 以下实验以100μl感受态细胞为例。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴中静置30分钟。
3.将离心管置于42℃水浴中热激60-90秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4.向每个离心管中加入900μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5.取100μl已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,直至干燥,倒置平板,37℃培养12-16小时。
产品订购:
货号 | 产品名称 | 规格 |
JSR1706-10 | SURE感受态细胞 | 10×100μl |
JSR1706-100 | 100×100μl |
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