一、吐温20的简要介绍

吐温20，英文名为：Tween-20，全称为：Polyethylene glycol sorbitan monolaurate，中文名为：吐温-20。吐温20是一种黄色或琥珀色的透明油状液体，有特殊的气味和轻微的苦味。分子中含有较多的亲水性基团，可与水、甲醇、乙醇、异丙醇、丙二醇、乙二醇、棉子油等混溶。是常用的非离子性去垢剂。使用移液器吸取时会感觉到一种滞后感。

二、吐温20在Western blot实验里的作用原理

吐温20可以通过降低溶液表面张力，使抗体更容易扩散并结合到膜上的目标蛋白，同时减少非特异性结合，从而提高检测的特异性和信噪比。

在Western blot实验里，封闭、一抗孵育、二抗孵育等步骤，或者说这种比较关键的步骤，大部分都用到TBST洗液（即Tris-Borate-Sodium Tween-20缓冲液）。TBST洗液里的吐温20是和BSA一样，对抗原抗体蛋白提供保护作用，同时因为是表面活性剂（司盘加成亲水的环氧乙烷基团后的化合物），可以减少抗体对抗原的非特异性作用，用于洗脱未结合的抗体、减少非特异性结合。

三、吐温20在Western blot实验里的注意事项

虽然Western blot 实验是生物基础实验之一，虽然基础但并不简单，翻车的概率还是很高的，主要原因是Western blot实验步在繁琐：从配置蛋白胶开始，到蛋白电泳、蛋白转膜、抗体孵育，流程多，时间长。这些环节中但凡有一个出错，就会导致实验的失败,，所以在Western blot 实验中，要充分发挥好吐温20的作用。如抗体浓度过高或封闭不充分导致背景过高，可以通过降低抗体稀释度、增加洗膜次数和Buffer用量，或在Wash Buffer中添加终浓度0.05%的吐温20来改善。

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