RNA提取是了解生物学的关键方法,但是由于样本中的基因组DNA污染和 RNA降解等因素导致偏差,提取RNA可能具有挑战性。此外,样本类型(细菌、血液、细胞和组织、粪便、FFPE和切片以及真菌)种类繁多,增加了RNA提取过程的复杂性。
Zymo Research的Direct-zol™ RNA Kits是RNA纯化试剂盒,可提供一种简化的方法,可直接从TRI Reagent®或类似试剂中的低输入样本(低至单个细胞)中纯化高达10 µg(每次制备)的高质量RNA。可从各种样品来源(细胞、组织、血清、血浆、血液、生物液体等)中有效分离总RNA,包括小RNA(17-200 nt)。通过常规相分离法分离RNA已被证明会选择性地富集某些miRNA物种,从而导致下游分析出现偏差。Direct-zol™方法可确保无偏差地回收包括miRNA在内的小RNA。该过程很简单。只需将TRI Reagent®中制备的样品直接应用于Zymo-Spin™柱,然后结合、清洗和洗脱RNA。无需相分离、沉淀或后纯化步骤。洗脱的RNA质量较高,适合后续的分子操作和分析(包括RT-PCR、转录分析、杂交、测序等)。整个过程通常只需7分钟。以下是常见的使用Direct-zol™ RNA Kits的一些问题:
1.zymo试剂盒提取rna第一步有沉淀吗
传统的RNA提取方法,常用氯仿抽提,然后经沉淀、洗涤、溶解步骤得到RNA。
而使用Zymo Direct-zol™ RNA Kits提取RNA的过程中,第一步通常不会直接观察到沉淀。这是因为Zymo的Direct-Zol RNA提取试剂盒设计为从Trizol或其他类似试剂中直接提取RNA,整个过程快速且不需要液相分离,从而减少了传统方法中可能出现的沉淀步骤。这意味着在开始使用Zymo试剂盒时,样品不需要经过会导致沉淀的步骤,而是直接通过特定的柱子和洗脱步骤来纯化RNA。因此,在第一步通常不会看到明显的沉淀物。
2.Direct-zol RNA提取试剂盒适合极少量的细胞吗?
Direct-zol RNA MicroPrep (R2060) 的设计能够将RNA纯化至单细胞输入(皮克量)。需要一种灵敏的定量方法(例如Qubit、qPCR等)
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