简石生物琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(TD407)

产品简介：

简石生物琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(TD407)为从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA提供了一种方案。只需将特殊配方的ADB溶胶液添加到含有DNA样本的凝胶片上，让其溶解，然后转移到所提供的核酸纯化柱-1号C上。不需要有机变性剂或氯仿。该产品利用快速核酸结合技术，在短短15分钟内产生高质量的DNA。使用简石生物琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(TD407)纯化的DNA非常适合用于DNA连接反应、测序、DNA标记反应、PCR等。

产品特点：

★    从琼脂糖凝胶中快速（15分钟）高产量地回收超纯的DNA；

★    独特的微量柱设计使得DNA可以在高浓度下洗脱到最小体积（≥10 µl）；

★    洗脱的DNA非常适合用于DNA连接、测序、标记、PCR等应用。

产品操作步骤：

以下离心操作步骤的离心力均在10,000 - 16,000 x g之间进行。

1. 使用刀片或手术刀把DNA片段从琼脂糖凝胶上切除下来并且移置到 1.5 ml 小型离心管内。注意: 从凝胶上切下的琼脂糖尽可能的要少。

2. 将3倍体积的ADB溶胶液 添加到每1体积从凝胶上切下的琼脂糖切块中。例如: 对于100 µl (mg) 的琼脂糖凝胶切块，添加300 µl的ADB缓冲液。

3. 在37-55℃下温水浴10分钟直到凝胶切块完全溶解。注意：确定凝胶切块完全溶解是很重要的步骤，在温水浴过程中可辅以温和的搅拌有助于凝胶的溶解。如果DNA大小超过8kb，加热之后需要额外添加等量胶块体积的水。 例如：100 µl (mg) 的琼脂糖凝胶切块，添加300 µl的ADB缓冲液，加热之后添加100µl的水。

4. 将溶解的琼脂糖切块溶液放到1号C中并把柱套在收集管里。

5. 离心1分钟后，倒掉过滤液。注意：柱所能容纳的样品体积为800 µl，所以，如果样品体积超过800 µl时，柱就要被多次填充和离心。

6. 添加200µl的DNA洗涤液到柱中离心1分钟，去除滤出液。

7. 重复第6步洗涤步骤。

8. 可选步骤：将收集管中的废液倒掉，并将1号C套回收集管中额外离心2分钟，尽量除去洗涤液，以免洗涤液中残留乙醇抑制下游反应。

9. 直接添加10 µl DNA洗脱液到柱基质中，将柱套在1.5 ml离心管中离心1分钟来洗脱DNA。注意：从柱中洗脱出的DNA产量与pH和温度有关。如果使用水来洗脱，确保pH是 >6.0。在向柱中加入水后静置1分钟可增加较大 (> 6 kb) DNA 的产量。在60-70℃的水中洗脱DNA可增加较大DNA (> 10 kb)的产量。 注意：如果试验需要的话，TE缓冲液 (10mMTris-HCl ，1mM EDTA，pH8.0) 或改进的TE(10mM Tris-HCl，0.1mMEDTA，pH8.5) 也可用来洗脱。

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