简石生物甲基化检测样本前处理试剂盒(JSR530)

产品简介：

简石生物甲基化检测样本前处理试剂盒(JSR530)用于核酸的亚硫酸氢盐转化修饰、提取、富集、纯化步骤。其处理后的产物用于临床基因检测。简石生物甲基化检测样本前处理试剂盒(JSR530)可从血浆、组织、粪便、细胞、血液等样本提取的基因组 DNA。DNA 投入范围 100pg～2ug，最佳量为200～500ng。该产品主要含有亚硫酸氢盐转化液、结合液、洗涤液、脱硫液、洗脱液、1 号 C 纯化柱、收集管等。在室温下储存即可。

产品操作步骤：

1. 取 130μl亚硫酸氢盐转化液加入含有 20μl DNA样品的 PCR 管中混匀。短暂离心确保管盖和管壁上没有残留液体；

注意：如果 DNA 的体积少于 20μl，则需要用无菌水补足至 20μl；

2. 把上述 PCR 管置于 PCR 仪器上运行以下程序：

① 98℃  8min

② 54℃  60min

③ 4℃  20h(可选)

3. 将1号C纯化柱套在收集管中，添加600μl的结合液至1号C纯化柱中；

4. 将步骤2中的全部混合液直接添加到1号C纯化柱中与结合液混匀，盖盖后颠倒混匀纯化柱；

5. 在≥10，000xg离心1分钟，弃滤液；

6. 添加 100μl 制备好的洗涤液到1号C纯化柱中，≥10，000 xg离心1分钟；

7. 添加 200μl 脱硫液到1号C纯化柱中，室温(20~30℃)放置15-20 分钟，在≥10，000xg离心1分钟；

8. 添加 200μl 制备好的洗涤液到1号C纯化柱中，在≥10，000 xg离心1分钟；

9. 重复步骤 8；

10. 将1号C纯化柱转移至一个干净的1.5ml离心管中并加入 10μl洗脱液直接加入到柱基质中。全速离心1分钟以洗脱 DNA。

注：DNA可以立即进行分析，也可以在-20℃或更低温度下(-80℃)储存以备后用。我们建议每次PCR 使用 1-4μl洗脱的 DNA，如有必要，最多可以使用 10μl。洗脱体积可以>10μl，具体取决于您的实验要求，但较小的洗脱体积会产生更高的 DNA 浓度。

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