细胞活性是判断体外培养细胞在某些条件下是否能正常生长的重要指标，如药物处理、紫外线照射、培养条件变化等。细胞活力检测是生物学研究中评估细胞状态的重要方法，常用来判断细胞的增殖、存活和健康状况。目前常用的方法有很多，如台盼蓝染色法、细胞凝集法、MTT法、CCK8法等。本文主要介绍细胞活力检测方法之CCK8法。

一、细胞活力检测CCK8法原理

CCK-8（Cell Counting Kit-8）是一种基于WST-8的试剂，在电子载体1-Methoxy PMS的作用下，被细胞中的脱氢酶还原生成水溶性的橙黄色产物Formazan。生成的Formazan量与活细胞的数量成正比，通过检测在450 nm处的吸光度，可以间接计算活细胞的量，从而进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法，操作更简便，可替代传统的MTT法。

二、细胞活力检测CCK8法实验步骤

1.取生长状态良好的细胞，调整细胞密度，按每孔100 μL细胞悬液接种于96孔板中，同时设空白孔（不加细胞但是加入同体积的培养基）。

注：通常细胞增殖实验每孔加入100 μL约含2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100 μL约含5000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。

2.根据实验设计对细胞进行培养和处理。

3.每孔加入10 μL的CCK-8溶液。继续孵育1~4 h。

注：CCK-8孵育条件与细胞培养条件相同。

4.用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。

5.结果计算：

细胞存活率(%)=(OD_sample−OD_blank)/(OD_control − OD_blank)×100%

抑制率(%)=(OD_control −OD_sample)/(OD_control − OD_blank)×100%

[注]:  OD_sample：实验孔的OD值

OD_control：对照孔的 OD 值

OD_blank：空白孔的OD值

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