脐带间充质干细胞无血清培养基是一款无血清、无动物源成分的人脐带间充质干细胞培养产品。脐带间充质干细胞无血清培养基呈淡黄色，含有谷氨酰胺和碳酸氢钠，不含HEPES和抗生素。可用于脐带间充质干细胞的原代培养及多次传代，同时还能保持其多向分化的潜能，使用时无需添加血清或血清替代物。

本文是一篇脐带间充质干细胞无血清培养基的使用说明，主要介绍脐带间充质干细胞无血清培养基的保存和使用方法。快来一起学习吧！

一、脐带间充质干细胞无血清培养基使用说明之保存方法

脐带间充质干细胞无血清培养基包含基础培养基和添加剂，基础培养基可置于2-8℃避光保存，培养基添加剂置于-20℃避光保存。按照使用方法配制好的脐带间充质干细胞无血清完全培养基应置于2-8℃避光保存，并在2周内使用完毕。

二、脐带间充质干细胞无血清培养基使用说明之使用方法

（一）脐带间充质干细胞无血清完全培养基的配制

取500mL脐带间充质干细胞无血清基础培养基，加入25mL脐带间充质干细胞无血清培养基添加剂，混合均匀即为脐带间充质干细胞无血清完全培养基。

注：如有需要，使用者可按照比例配制所需用量。

（二）脐带间充质干细胞传代培养与冻存（以T75培养瓶为例）

（1）将脐带间充质干细胞无血清完全培养基平衡至室温。

（2）清洗：取出细胞，吸出培养瓶中的培养基弃掉，每个T75培养瓶用10 ml~15ml PBS润洗细胞一次。

（3）消化：加入3mL消化液，使消化液浸润整个细胞生长表面后，置于CO₂培养箱中，37℃消化2min~6min，镜检观察，约80%以上细胞回缩变圆并脱落时，加入两倍体积脐带间充质干细胞无血清完全培养基终止消化，吹打使细胞分散成单细胞，进行细胞计数。

注：若大部分细胞回缩变圆但不脱落，可轻轻拍打瓶壁使其脱落。若细胞不脱落，可延长消化时间。

（4）收集：300g，5min离心收集细胞沉淀，弃掉上清。

（5）传代/冻存：若进行传代操作，用脐带间充质干细胞无血清完全培养基重悬细胞，按照合适的接种密度（推荐8000cells/cm²）将细胞接种到已加入平衡至室温的20mL脐带间充质干细胞完全培养基的T75培养瓶中，放入37℃、5%CO₂培养箱中继续培养。

若冻存细胞，则将步骤（4）中收集的细胞沉淀，按冻存密度加入适量细胞冻存液轻柔吹打重悬细胞并混匀，转移至细胞冻存管中，冻存管置于程序降温盒中，-80℃过夜，24h 后转移至液氮中进行长期保存。

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