脐带间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells，MSCs）是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，它能分化成许多种组织细胞，具有广阔的临床应用前景。本篇文章主要介绍利用脐带间充质干细胞无血清培养基，对脐带间充质干细胞进行分离与培养。

脐带间充质干细胞无血清培养基是一款无血清、无动物源成分的人脐带间充质干细胞培养产品。可用于脐带间充质干细胞的原代培养及多次传代，同时还能保持其多向分化的潜能，如分化为骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞的能力，使用时无需添加血清或血清替代物。

脐带间充质干细胞的分离与培养方法如下：

1.完全培养基的配制

取500ml脐带间充质干细胞无血清基础培养基，加入25ml脐带间充质干细胞无血清培养基添加剂，混合均匀即为脐带间充质干细胞无血清完全培养基。

2.人脐带间充质干细胞原代细胞的分离与培养（以T75培养瓶为例）

（1）取出脐带，将脐带外表面消毒并清洗去除血迹，剪成约2cm~4cm的小块，去除动静脉，制成边长5mm~10mm的小块，置于T75培养基瓶中排列整齐，每瓶铺入15~20 块。

注：需要区分脐带外表皮侧和华通胶侧，保证华通胶侧贴在培养瓶底部。

（2）将培养瓶翻转，置于CO₂培养箱中，37℃静置60min。

（3）将培养瓶取出，向培养瓶中缓慢加入15ml 脐带间充质干细胞无血清完全培养基，放入37℃、5%CO₂培养箱中培养。

（4）第7天，每个T75培养瓶补加新鲜的脐带间充质干细胞无血清完全培养基5ml。

（5）补液后每3天进行半换液，吸出10ml培养基弃掉，再加入10ml新鲜的脐带间充质干细胞无血清完全培养基。

（6）第13天开始，观察组织块，如组织块周围细胞融合度达到90%，可收获细胞，否则继续每3天进行半换液至组织块周围细胞融合度达到90%。

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