你知道Wako Phos-tag™ 蛋白磷酸化丙烯酰胺能被大量高分文献引用的特别之处在哪吗?让我们一起来看看吧!
经过电泳分离,Phos-tag™ SDS-PAGE能够根据磷酸化程度的差异将蛋白质分为磷酸化和非磷酸化的两部分。分离后的凝胶可用于染色、Western blotting和质谱分析等后续实验。只需在制备凝胶的过程中添加Phos-tag™ 分子和Acrylamide结合形成的Phos-tag™ Acrylamide与二价金属(如MnCl2或ZnCl2),Phos-tag™ SDS-PAGE凝胶即可用于进行实验。
一、Wako Phos-tag™ 蛋白磷酸化丙烯酰胺AAL-107(300-93523)原理
二、Wako Phos-tag™ 蛋白磷酸化丙烯酰胺AAL-107(300-93523)产品特点
★ 产品的应用与氨基酸残基的种类和位置无关,可适用于未知磷酸化蛋白的磷酸化分析。同时也可用于探测新的磷酸化位点。
★ 磷酸化位点存在着不同数目和位置的磷酸化形式,这些形式可以被分离出来。通过此方法,我们可以确定磷酸化水平以及磷酸化形式的数量。
★ 此技术可以同时检测磷酸化和非磷酸化蛋白,不仅可以定量多种磷酸化形式,还能轻松判断是否发生了磷酸化现象。
★ 这种方法无需使用放射性物质,也没有特殊的仪器要求,只需要常规的SDS-PAGE试剂和设备即可进行实验。因此,实验简便且成本较低。
★ 在电泳后,我们可以进行WB、MS以及二维电泳分析。WB可以结合内参进行蛋白质分析,MS可以确定不同磷酸化形式的磷酸化位点组合,而二维凝胶电泳则可以将具有相同等电点或分子量的磷酸化形式分离开来。
三、Wako Phos-tag™ 蛋白磷酸化丙烯酰胺AAL-107(300-93523)的应用
四、Wako Phos-tag™ 蛋白磷酸化丙烯酰胺AAL-107(300-93523)的应用案例
案例一:α-casein 随时间变化的去磷酸化反应
经过碱性磷酸酶处理的α-casein样品,使用Phos-tag™ SDS-PAGE或常规SDS-PAGE来检测样品随时间的变化(温育时间:0-120分钟)。
案例二:WB实例
检验:抗p35抗体
样品:大鼠脑提取液
条带1:孵育前的大鼠脑提取液
条带2-5:用MC或ATP孵育(+),未孵育(-) *Microcystin:微囊藻毒素(一种磷酸酶抑制剂)
五、Wako Phos-tag™ 蛋白磷酸化丙烯酰胺AAL-107(300-93523)部分高分文献引用例证
[1] Regulation of PKD by the MAPK p38d in Insulin Secretion and Glucose Homeostasis,Cell,136,235-248(2009),G.Sumara,I.FormentiniS.Collins,I.Sumara,R.Windak,B.Bodenmiller,R.Ramracheya,D.Caille,H.Jiang,K.A.Platt,P.Meda,R.Aebersold,P.R orsman,and R.Ricci1,IF:66.85
[2] Dbf4-Dependent Cdc7 Kinase Links DNA Replication to the Segregation of Homologous Chromosomes in Meiosis l,Cell,135,662-678(2008)J.Matos,J.J.Lipp,A.Bogdanova,S.Guillot,E.Okaz,M.Junqueira,A.Shevchenko,and W.Zachariae,IF:66.85
[3] PINK1-Phosphorylated Mitofusin 2 Is a Parkin Receptor for CullingDamaged Mitochondria,Science,Apr 2013;340:471-475.,Yun Chenand Gerald W.Dorn,ii,IF:63.71
[4] Parkin-mediated mitophagy directs perinatal cardiac metabolicmaturation inmice,Science,Dec 2015;350:aad2459.,Guohua Gong,Moshi Song,Gyorgy Csordas,Daniel P.Kelly,Scot J.Matkovich and Gerald W.Dom.II,IF:63.71
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