简石生物零内毒素质粒小量中提取试剂盒(TD436)

产品简介：

简石生物零内毒素质粒小量中提取试剂盒(TD436)具有独有的显色反应，可以直接观察到细胞裂解中和的程度，极大方便操作者判断其状态。快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好，内毒素含量极低，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序 转染等各种分子生物学实验。此产品仅供科研使用。

产品特点：

★    DNA 纯度：获得的质粒产量高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序转染等各种分子生物学实验。一般情况Abs260/28021.8，Abs260/230>2.0，内毒素含量<0.05EU/μg;

★    质粒DNA产量：每次可提取到约100ug，主要依据质粒的拷贝数，培养物的成长环境等因素；

★    质粒DNA大小：最高可达200 kb。(片段长度不同与菌种相关)；

★    洗脱体积：250 μl;

★    操作温度：室温(15-30°C)；

★    操作时间：18分钟。

产品操作步骤：

1. 取5~10ml过夜培养的菌液，全速离心力下离心15-20秒，尽可能多的去除上清，收集菌体；

2. 用1ml溶液P1重悬菌体沉淀，可用吸头反复吹打或涡旋振荡至彻底悬浮。 （如果有未彻底混匀的菌块，会影响裂解，导致提取量和纯度偏低；

3. 加1ml的溶液P2，温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解，室温放置2-3分钟。（温和地混合，不要剧烈震荡，以免质粒DNA剪切断裂！所用时间不应超过5分钟！以免质粒受到破坏。此时菌液应变得清亮粘稠，如果菌体少，很快清亮粘稠后就可以做下一步。）；

4. 加1ml溶液P3（预冷），立即温和地上下翻转3-4次，中和完全后会出现稀松黄色絮状沉淀。（中和完全后溶液完全呈现为黄色透明液相，不应有黏性抱团现象中和物。）；

5. 将上述中和的裂解物在冰上孵育5分钟。然后在16,000xg的离心力下离心5分钟；

6. 将步骤5中的~3ml上清转移到干净的15ml离心管内。（不要碰到下面的黄色沉淀）；

7. 在上述离心管内加入1ml质粒DNA结合液，盖上盖子颠倒8次左右使其混匀（如果出现浑浊现象，会造成堵住子情况，需要补少量质粒结合液，浑浊现象消失）。

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