Zero endotoxin plasmid in small amount extraction kit
简石生物零内毒素质粒小量中提取试剂盒(TD436)
产品介绍
产品简介:
简石生物零内毒素质粒小量中提取试剂盒(TD436)具有独有的显色反应,可以直接观察到细胞裂解中和的程度,极大方便操作者判断其状态。快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好,内毒素含量极低,可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序 转染等各种分子生物学实验。此产品仅供科研使用。
产品特点:
★ DNA 纯度:获得的质粒产量高、纯度好,可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序转染等各种分子生物学实验。一般情况Abs260/28021.8,Abs260/230>2.0,内毒素含量<0.05EU/μg;
★ 质粒DNA产量:每次可提取到约100ug,主要依据质粒的拷贝数,培养物的成长环境等因素;
★ 质粒DNA大小:最高可达200 kb。(片段长度不同与菌种相关);
★ 洗脱体积:250 μl;
★ 操作温度:室温(15-30°C);
★ 操作时间:18分钟。
产品操作步骤:
1. 取5~10ml过夜培养的菌液,全速离心力下离心15-20秒,尽可能多的去除上清,收集菌体;
2. 用1ml溶液P1重悬菌体沉淀,可用吸头反复吹打或涡旋振荡至彻底悬浮。 (如果有未彻底混匀的菌块,会影响裂解,导致提取量和纯度偏低;
3. 加1ml的溶液P2,温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解,室温放置2-3分钟。(温和地混合,不要剧烈震荡,以免质粒DNA剪切断裂!所用时间不应超过5分钟!以免质粒受到破坏。此时菌液应变得清亮粘稠,如果菌体少,很快清亮粘稠后就可以做下一步。);
4. 加1ml溶液P3(预冷),立即温和地上下翻转3-4次,中和完全后会出现稀松黄色絮状沉淀。(中和完全后溶液完全呈现为黄色透明液相,不应有黏性抱团现象中和物。);
5. 将上述中和的裂解物在冰上孵育5分钟。然后在16,000xg的离心力下离心5分钟;
6. 将步骤5中的~3ml上清转移到干净的15ml离心管内。(不要碰到下面的黄色沉淀);
7. 在上述离心管内加入1ml质粒DNA结合液,盖上盖子颠倒8次左右使其混匀(如果出现浑浊现象,会造成堵住子情况,需要补少量质粒结合液,浑浊现象消失)。
产品订购:
货号 | 产品名称 | 规格 |
TD436-50 | 零内毒素质粒小量中提取试剂盒 | 50次 |
TD436-200 | 零内毒素质粒小量中提取试剂盒 | 200次 |