赛默飞Lipofectamine 3000转染试剂(L3000015)

产品简介：

一、绝佳效率，高效转染多种难转染细胞 

Lipofectamine 3000试剂采用赛默飞最先进的脂质纳米颗粒技术，实现绝佳转染性能和可重复性的结果。其可针对最广泛类型的常见及难转染细胞，实现超高转染效率（图1），同时提供更高的细胞活力。

图1.Lipofectamine 3000试剂性能优于Invitrogen Lipofectamine 2000和FuGENE HD试剂。使用上述试剂分别在96孔板内转染HEK 293、HeLa、LNCaP、HepG2和A549细胞，并在转染48小时后分析GFP表达。在所有5种细胞系内， Lipofectamine 3000试剂GFP转染效率均高于 Lipofectamine 2000和FuGENE HD试剂。

图2.Lipofectamine 3000的转染步骤简单易用，同时仍确保了在多种细胞类型中的最佳性能和可靠性。

二、性质温和毒性低

研发Lipofectamine 3000时，我们优化了转染过程的全部四个步骤，并结合了我们最先进的脂质纳米颗粒技术。绝佳的转染性能可以降低所需的试剂量，并降低所有可能对您的细胞系产生毒性的风险。

图3.使用3种不同试剂以图中所示的用量在96孔板内向Hela细胞中转染绿色荧光蛋白（GFP）–表达载体。转染后48小时使用流式分析测定转染效率和GFP表达强度。Lipofectamine 3000试剂相比Lipofectamine 2000试剂和Lipofectamine LTX试剂获得了更高的转染效率和蛋白表达。

产品应用：

一、助力您的癌症研究

使用与癌症最相关的细胞系得到与您研究的问题最相关的答案。凭借更广的适用细胞类型、更高的转染效率，Lipofectamine 3000试剂让您能够灵活选择研究所用的细胞系。

表 1.Lipofectamine 3000试剂在多种细胞系上都能获得比Lipofectamine 2000试剂更高的转染效率。

转染效率(%)*<30%     30~50%    51~79%    >80% 

Lipofectamine 3000试剂在一系列不同组织来源的癌症细胞系中比其他领先的转染试剂如Lipofectamine 2000试剂，转染效率更高。使用Lipofectamine 2000试剂时仅有25%的癌症细胞系可以被认为易于转染（转染效率>50%），而使用Lipofectamine 3000试剂时认为易于转染的细胞占60%。

图4.使用Lipofectamine 2000 试剂和Lipofectamine 3000试剂向17个细胞系内转染GFP表达质粒，转染在24孔板内进行，0.5 µg质粒/孔。48小时后分析基因表达。每个条件重复了3次，数据点表示转染效率+SD.

二、制备诱导多能干细胞（iPSC）

Lipofectamine 3000的高转染效率和Epi5™ Episomal iPSC重编程试剂盒结合可以实现高效体细胞重编程，无需电转染。

图5.Lipofectamine 3000试剂盒电转染的重编程效率比较。使用Lipofectamine 3000 试剂或Neon转染系统将Epi5™载体转染进入BJ成纤维细胞以及新生儿（HDFn）和成人（HDFa）皮肤成纤维细胞并将其重编程为iPSC。采用明场显微镜和碱性磷酸酶(B) 染色法，对克隆进行(A)可视化。

三、改善基因组编辑结果

Lipofectamine 3000试剂的研发突破了细胞转染的界限并促进了新技术例如基因组编辑在生物学相关领域的应用。使用这一新试剂，Invitrogen GeneArt TALs和CRISPR在HepG2和U2OS细胞中对基因组AAVS1位点进行靶向编辑，并显示出更高的转染效率、平均荧光强度和基因组剪切效率。这些转染技术上的进步简化了令人头疼的下游工作流程，使得对干细胞的操作更为简单，并提高了转基因在细胞基因组上的位点特异性插入效率。

图6.GeneArt TALs和CRISPRs剪切效率。TALs 和 CRISPRs 靶向 (A) U2OS 和(B) HepG2 细胞系内的AAVS1 位点。采用Invitrogen GeneArt 基因组剪切检测试剂盒分析剪切效果。

图7.CRISPR载体的转染效率和蛋白表达。含有报告基因开放阅读框（OFP）的载体被Lipofectamine 2000或Lipofectamine 3000 试剂转染进 (A) U2OS 和 (B) HepG2细胞系。柱状图显示报告基因表达，图片显示相应的细胞内OFP荧光蛋白的表达。

四、转染干细胞

图8.转染干细胞。使用Lipofectamine 3000试剂转染 (A) H9 ESCs 或(B) iPSCs。使用荧光显微镜观察细胞并通过流式细胞仪检测转染效率。

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